- Weist alle Mycoplasmen-Arten nach, die in Zellkulturen gefunden werden
Kit-Bestandteile: ReaktionsmixPufferlösungPositive 'template'-KontrolleInterne DNA 'template'-Kontrollenterne Primer-Mix-KontrolleAnwendung: - Der PCR-Mycoplasmen-Nachweiskit wurde zum Nachweis von Mycoplasmen entwickelt, die biologische Materialien kontaminieren können, wie z. B. Zellkulturzellen. Bisher wurden Mycoplasmen zum Nachweis auf Selektivmedien kultiviert - eine Methode die eine Woche in Anspruch nimmt. Dieser PCR-Nachweis liefert Ergebnisse innerhalb von Stunden. Da die Anwesenheit von Mycoplasma-Kontaminationen einfach durch den Nachweis bestimmter Banden amplifizierter DNA erbracht wird, ist es nicht notwendig Proben radioaktiv zu markieren, die Enzymmenge zu berechnen, die der dNTPs oder des Puffers. Stattdessen wird dieser ready-to-use optimierte PCR-Mix geliefert. Dieser Primer-Set mit sehr hoher Sensitivität erlaubt den Nachweis von verschiedenen Mycoplasma-Arten (M. fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. salivarium, M. hominis, M. pulmonis, M. arthritidis, M. bovis, M. pneumoniae, M. pirum, M. capricolum) und von Acholeplasma und Spiroplasma-Arten
Testprinzip: - rRNA-Gensequenzen von Prokaryoten, Mycoplasmen eingeschlossen, sind sehr stark konserviert. Die Länge und Sequenzen der Zwischensequenzen in dem rRNA- Operon (z. B. die Region zwischen den 16S- und 23S-Genen) variiert dagegen von Spezies zu Spezies. Die Nachweismethode nutzt die PCR mit Primern, die 1.) die eine konservierte und Mycoplasmen-spezifische 16S-rRNA-Genregion mit zwei Primern vervielfältigt und 2.) des Nachweises des amplifizierten Fragmentes mittels Agarose-Gelelektrophorese. Dieses System erlaubt nicht die Vervielfältigung von DNA, die aus anderen Quellen stammt, z. B. den Zellkulturzellen oder Bakterien. Amplifikation der Gensequenzen mittels PCR unter Verwendung dieses Primersets erhöht die Sensitivität und die Spezifizität des Nachweises.
Literatur: (1)Rottem, S. & Barile, F.M. (1993) TIBTECH 11, 143-150 Lagerung: -20°C, wiederholte Wechsel der Temperatur des Reaktionsmixes vermeiden! Wenn in Gebrauch, Reaktionsmix immer auf Eis halten! Versand mit Nasseis Inland und Trockeneis Ausland HS:38220000
Preis
428,70 EUR
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