Biochemikalien »» Immunoassay-Puffer

Art.Nr. APP6485A/0.050
CrossDown Buffer

Synonym: Kreuzreaktivität, Matrixeffekt HS-Nr. 38220000Lagerung -20°C, Versand bei Umgebungstemperatur Immunoassay-Puffer zur Minimierung unspezifischer Bindungen, Kreuzreaktivitäten und MatrixeffektenAnwendung im ELISA, EIA, Western-Blot, Immuno-PCR und Multianalyt-ImmunoassaysPhosphat-freiErsetzt übliche Probenpufferready-to-use,stabilisiert mit 0,1 % ProClin® 300*, pH 7,2Der CrossDown Buffer wurde zur Minimierung von unspezifischen Bindungen, Kreuzreaktivitäten und Matrixeffekten bei Immunoassays entwickelt. Seine Einsatzgebiete sind neben dem ELISA, EIA oder Western Blot auch Immuno-PCR, Protein Arrays und Multianalyt-Immunoassays.pH-Wert: pH 7,2 ± 0,2Stabilisator: enthält 0,005 % ThimerosalHaltbarkeit: bei -20°C: 1 Jahr, wiederholtes Einfrieren ist möglich, bei 2 - 8°C: 6 MonateBei Fluoreszenz-Immunoassays kommt es mitunter zu Quench-Effekten von Fluorescein-Farbstoffen durch Bestandteile der Immunoassays – oder möglicherweise auch durch Puffer-Bestandteile. Daher empfehlen wir die Verwendung von Oyster** -(Denovo Biolabels), CyDye*** - (Amersham) oder Alexa**** - Fluoreszenzfarbstoffen (Molecular Probes) Der Puffer sollte unmittelbar vor Gebrauch nochmals durch Schwenken gründlich durchmischt werden. Der CrossDown Buffer wird an Stelle des üblichen Probenpuffers eingesetzt. Standards und Proben können beliebig, jedoch mindestens 1 : 2 in dem CrossDown Buffer verdünnt werden. Es ist jedoch darauf zu achten, daß die Standards und Proben gleich behandelt werden. Bei einigen Immunoassays könnte auch eine Vorverdünnung des CrossDown Buffer mit voll entsalztem Wasser vor Verwendung sinnvoll sein, falls bei unverdünnter Verwendung auch die spezifische Bindung reduziert wird. Dieses ist vereinzelt bei niederaffinen Antikörpern zu beobachten. Die Inkubation des Detektorantikörpers kann ebenfalls in gewünschter Verdünnung in dem Puffer durchgeführt werden. Dies ist dann empfehlenswert, wenn der Detektorantikörper im Verdacht steht, für unspezifische Bindungen bzw. Kreuzreaktivitäten verantwortlich zu sein. Bei Verwendung eines polyklonalen Detektorantikörpers, der zur Vermeidung von unspezifischen Bindungen bzw. Kreuzreaktivitäten mit CrossDown Buffer verdünnt wird, könnte es zur Verbesserung des Assays erforderlich sein, die Konzentration des Detektorantikörpers moderat zu erhöhen. Bei besonders störanfälligen und empfindlichen Assays – beispielsweise Immuno-PCR – kann der CrossDown Buffer zusätzlich auch als Waschpuffer eingesetzt werden. CrossDown in der FACS-Analyse: CrossDown ersetzt bei der FACS-Analyse den normalerweise verwendeten Assaypuffer und wird genauso verwendet, wie der ursprüngliche Assaypuffer. Falls CrossDown zu stark wirken sollte (d.h. eventuell Verringerung auch des spezifischen Signals auftritt) kann CrossDown mit dem ursprünglichen Assaypuffer verdünnt werden (1 : 2 bis 1 : 10 Verdünnung). Alternativ können andere physiologische Puffer wie z.B. PBS oder Hepes für die Verdünnung eingesetzt werden. Am einfachsten ist aber meistens die Verdünnung mit dem ursprünglich verwendeten Assaypuffer.*ProClin® ist ein eingetragenes Warenzeichen der Firma Rohm und Haas.**Oyster Dye ist eingetragenes Warenzeichen der Firma Denovo Biolabels***CyDye ist eingetragenes Warenzeichen der Firma Amersham Bioscience****Alexa Fluor Dye ist eingetragenes Warenzeichen der Firma Molecular ProbesLiteratur:Miller, J.J. (2004) Clinical Laboratory International 28, (2), 14-17Kusnezow, W., Hoheisel, J.D. (2003) J. Mol. Recognit. 16, 165-176Patton, W.F. (2000) Electrophoresis 21, 1123-1144MacBeath, G. (2002) Nat. Genet. 32, 526-532Miller, J.J., Valdes, R.Jr. (1992) J Clin Immunoassays 15, 97-107Wood, W.G. (1991) Scand. J. Clin. Lab. Invest. Suppl. 205, 105-112Kricka, L.J. (1999) Clinical Chemistry 45 (7), 942-956Span, P.N., Grebenchtchikov N., Geurts-Moespot, J., Sweep, C.G.J. (2003) Clinical Chemistry 49 (10), 1708-1709

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ARTIKEL
Maße   Preis   Art.Nr.
50ml 103.40 EUR APP6485A/0.050
125ml 221.60 EUR APP6485A/0.125
500ml 811.40 EUR APP6485A/0.5

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