Coomassie® Brillantblau R-250 (C.I. 42660), (Brillantblau R, Xylenbrillantcyanin, C45H44N3NaO7S2), M= 825,98 g/mol
CAS-Nr.: 6104-59-2, HS-Nr.: 32041200, EG-Nr.: 2280605
Lagerung: RT, LGK: 10-13, Giftklasse (CH): 4, WGK: 1
Spezifikation:
- E 1%/1 cm, 560 nm.....115 bis 125 (pH 7,0)
Hinweis:
Coomassie® Brillant Blue R-250 ist einer der am weitesten verbreiteten Farbstoffe für Proteine nach Polyacrylamid-Gelelektrophorese. Der Protein-Farb-Komplex hat ein Absorptionsmaximum bei 549 nm, der Farbstoff allein bei 555 nm (in 0,01 M Citratpuffer, pH 3). Es gibt viele Protokolle für sensitive Färbungen mit Coomassie®. Die Sensitivität reicht dabei bis auf 25 ng Protein. Wir empfehlen folgendes Protokoll: I. Färbelösung: 0,1 % Coomassie® Brillant Blau R-250 (Art.-Nr. APP1092), 20 % Methanol (oder Ethanol), 10 % Essigsäure. Das SDS-Gel (ohne 'stacking gel') wird für 1 Std. bei 60°C gefärbt oder für 2 Std. bei 50°C oder über Nacht bei RT. II. Entfärbelösung: 20 % Methanol (oder Ethanol), 10 % Essigsäure. Das Gel wird für 3 - 4 Stunden bei 50 - 60°C entfärbt. Es sollten Schwämme zugefügt werden. Im Anschluß daran wird das Gel für 15 Minuten in Wasser gewaschen und dann unter Vakuum bei 60°C für 2 - 3 Stunden getrocknet.
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