| Bezeichnung: | LBP (Lipopolysaccharide binding protein) ist ein 58-kD Akutphasen Glycoprotein und bindet mit hoher Affinität an den Lipid A Teil des Lipopolysaccharids (LPS) und katalysiert die CD14 und TLR4 abhängige zelluläre Aktivierung durch LPS. LBP interagiert mit CD14, TLR2, TLR4 und dem co-Rezeptor MD-2. Menge 10 µg, lyophilisiertLBP-Gehalt 0.5mg/ml PBS, pH 7.2 (bestimmt mittels Maus-LBP-ELISA mit definierten Standards), Rekonstituiert wird jedes Röhrchen mit 20µl Wasser für 0,5mg/mlCharakteristik Das muLBP wird von maus-LBP transfizierten CHO-Zellen ins serumfreie Kulturmedium sezerniert. Vor der Transfektion wurde die komplette murine LBP-cDNA durch PCR amplifiziert und in den Expressionsvector p-POL-DHFR kloniert.Reinigung durch His-tag über Talon (Clontech) und durch Polyakrylgelelektrophorese SDS page kontrolliert, Achtung: His-tag am C-terminalen Ende des LBP hat keine Proteasebindungsstelle und ist nicht abzuspaltenBesonderheit: bis zu 2µg/ml LBP vermitteln Bindung von FITC-LPS (0.5µg/ml) an CD14+CHO Transfektanten (2 x 106/ml)Endotoxingehalt < 0.1 ng/ml nach Erhitzen 5', 75°C (LAL-test, Chromogenix)Lagerung -80°CAchtung!! LBP präzipitiert bei raschem Wechsel von Temperatur bzw. pH-Wert.... Die beste Arbeitstemperatur ist im Eisbad |
