Entnehmen, verdünnen und bereiten Sie Proben und Volumina nach Bedarf gemäß Spezifikationen, Richtlinien, behördlichen Standardvorschriften und/oder erwarteten Ergebnissen vor. Rekonstituieren Sie das Fläschchen mit 6 ml sterilem Verdünnungsmittel unter aseptischen Bedingungen und geben Sie es zu 100 ml geschmolzener Agarbasis, die auf 50 °C abgekühlt ist. Einmal ergänzt nicht überhitzen. Gießen Sie das komplette Medium in Petrischalen (oder Röhrchen) und verteilen Sie die Platten nach dem Erstarren auf einer flachen Oberfläche entweder durch Ausstreichen mit der Spiralmethode oder durch Verdünnungsbanc. Platten in anaerober Atmosphäre bei 35 ± 2 °C für 20–24 h inkubieren. Um ein selektiveres Medium zu erhalten, wird bei 44 °C ± 1 inkubiert. Längere Inkubationszeiten als oben angegeben oder andere Inkubationstemperaturen können erforderlich sein abhängig von der Probe oder den Spezifikationen. Zählen Sie nach der Inkubation alle Kolonien, die auf der Oberfläche des Agars erschienen sind. C. perfingrens wächst aufgrund der Eisensulfidfällung in schwarzen Kolonien. Eine mutmaßliche Isolierung von Clostridium perfringens muss durch weitere mikrobiologische und biochemische Tests bestätigt werden.